AH109 Chemically Competent Cell 产品说明书

产品规格
AH109：                      10×100μl            保存条件：-80℃

PGADT7（control vector）：10ng/μl    10μl            保存条件：  4℃
Carrier DNA：             5ug/μl  100 μl            保存条件：  4℃
PEG/liAC：                        5 ml            保存条件：  4℃
 
 
基因型
 
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ,LYS2 : : GAL1_UAS-GAL1_TATA-HIS3, MEL1 GAL2_UAS-GAL2_TATA-ADE2, URA3::MEL1_UAS-MEL1_TATA-lacZ

产品说明
 AH109感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，MATa型，可转化质粒或mating操作，Transformation  marker为: trp1, leu2，报告基因为：HIS3, ADE2, lacZ, MEL1，经PGADT7质粒检测转化效率为10⁴cfu/μg DNA 。

操作方法

1. 取100 μl冰上融化的AH109感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒1-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/liAC  500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min时翻转6-8次混匀）。
2. 将管放42度水浴15min  （7.5 min时翻转6-8次混匀）。  
3. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。                      
4. ddH2O 50ul重悬，涂板。
5. 28-30度 ，培养48-96小时。
 

注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。