淀粉酶(AMS)测试盒说明书
                              (碘-淀粉比色法)
一、测定原理:
       淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS的活力。                       
二、试剂组成与配制:(100T/96样)
1.试剂一:0.4mg/ml底物缓冲液,60ml*1瓶,4℃避光保存6个月。
2.试剂二:0.1mol/L碘贮备液,7ml*1瓶,4℃室温保存6个月。
0.1mol/L碘应用液的配制:按碘贮备液:双蒸水=1:9稀释,现用现配4℃避光保存。
三、操作表:
 
  测定管 空白管
底物缓冲液(ml)37℃预温5分钟 0.5 0.5
待测样本(ml) 0.1  
混匀,37℃水浴,准确反应7.5分钟
碘应用液(ml) 0.5 0.5
双蒸水(ml) 3.0 3.1
        
         
混匀,波长600nm,1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度。
     注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将(空白OD-测定OD控制住0.05~0.150之间)
四、计算公式与举例:                                 
1.血清(浆)计算举例:
单位定义:100ml血清(浆)中的AMS,在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉为10个单位。
计算公式:

计算举例:
       取某人血清用生理盐水10倍稀释后取样0.1ml作AMS测定,测定管OD0.308,空白管OD为0.383,则计算结果为:
  
2.组织中计算与举例
 单位定义:组织中每毫克蛋白在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。
  计算公式:

计算举例:
例1:取1%大鼠肺匀浆0.1ml作AMS测定,测定管OD为0.275,空白管OD为0.383,1%大鼠肺匀浆的蛋白浓度为0.5677mgprot/ml,则计算结果为:

例2:取2.5%鱼肠匀浆0.1ml作作AMS测定,测定管OD为0.274,空白管OD为0.388,2.5%鱼肠匀浆的蛋白浓度为0.5960mgprot/ml,则计算结果为:

 
 
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