T1感受态细胞 ,

包装：20*100ul  100*100ul
产品介绍：Mach1-T1 菌株由野生型 non-K-12 E. Coli W 菌株改造而来，
是目前生长速度较快的感受态细胞之一，在 平板上 9 h 可见
克隆，缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质粒 DNA 的产量和质
量；重组酶缺陷型 (recA1398)减少插入片段的同源重组概率，
保证了插入 DNA 的稳定性；lacZ M15 的存在使 Mach1-T1 可
用于蓝、白斑筛选；tonA 突变赋予 Mach1-T1 菌株对噬菌体
T1 和 T5 的抗性。
Mach1-T1 感受态细胞 经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化
效率>5x108 cfu/μg DNA。
操作步骤：
1.Mach1-T1 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌块
融化，加入目的 DNA（质粒或连接 产物）并用手拨打 EP 管底
轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置 25 分钟。
2.42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会
降低转化效率。
3.向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌2YT 或 LB培养
基，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分钟。
4.5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹
打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。
5.将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选
操作，将平板放 37℃培养至少 13 h。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中 8 分钟内加入目
标 DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间 存放会降低转化效
率。
2.混入目的 DNA 时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于
涂板的菌量。